PRAVILNIK
O METODAMA UZIMANJA UZORAKA I VRŠENJA HEMIJSKIH I FIZIČKIH ANALIZA ALKOHOLNIH PIĆA

("Sl. list SFRJ", br. 70/87)

 

OPŠTE ODREDBE

Član 1

Kontrola kvaliteta alkoholnih pića, u smislu ovog pravilnika, vrši se na uzorcima uzetim za ispitivanje po metodama koje su propisane ovim pravilnikom i čine njegov sastavni deo.

Član 2

Pod metodama kojima se vrši kontrola kvaliteta alkoholnih pića podrazumevaju se:

1) metode uzimanja uzoraka alkoholnih pića;

2) metode hemijskih i fizičkih analiza alkoholnih pića.

Član 3

Metodama uzimanja uzoraka alkoholnih pića utvrđuju se postupak i način uzimanja uzoraka na kojima se vrši kontrola kvaliteta tih proizvoda.

Član 4

Metodama hemijskih i fizičkih analiza alkoholnih pića utvrđuju se uslovi i postupci za vršenje hemijskih i fizičkih ispitivanja na uzorcima proizvoda radi proveravanja njihovih hemijskih i fizičkih svojstava.

Član 5

Svi reagensi koji se upotrebljavaju za hemijske analize proizvoda na koje se odnose odredbe ovog pravilnika moraju biti analitičke čistoće, a voda mora biti destilovana.

Član 6

Preciznost određivanja hemijskih i fizičkih analiza alkoholnih pića, shodno odredbama ovog pravilnika, utvrđuje se prema principima analitičke prakse, a izražava se kao relativno odstupanje od proseka dobijenog od najmanje dva paralelna određivanja. Dozvoljena razlika rezultata dva pojedinačna određivanja koja je paralelno ili ubrzo jedno za drugim, na istom uzorku za ispitivanje, istom metodom i u istim uslovima izvršio isti analitičar u istoj laboratoriji, mora biti u granicama propisane metode, ako je to utvrđeno ovim pravilnikom.

1. Metode uzimanja uzoraka alkoholnih pića

Član 7

Uzorci alkoholnih pića uzimaju se:

1) u proizvodnji - iz proizvodnih partija;

2) u prometu - iz ambalažnih jedinica pošiljke.

Član 8

Uzorke alkoholnih pića mora da uzima stručno lice.

Član 9

Uzorak alkoholnih pića za ispitivanje mora da predstavlja prosečni sastav celokupne količine proizvoda od koga se uzorak uzima u količini koja je potrebna za laboratorijsko ispitivanje.

Član 10

Pod proizvodnom partijom alkoholnih pića, u smislu ovog pravilnika, podrazumeva se odgovarajuća količina proizvoda iste vrste i odgovarajuće zapremine.

Pod ambalažnim jedinicama alkoholnih pića podrazumevaju se utvrđene količine proizvoda iste vrste, upakovane u pojedinačna ambalažna pakovanja odgovarajuće zapremine, sa obaveznom oznakom za identifikaciju.

Član 11

Uzorak alkoholnih pića mora da sadrži najmanje dva primerka uzeta pojedinačno, i to za analizu i superanalizu, s tim što oni moraju biti identični po sastavu i jednaki po masi. Na zahtev organizacije udruženog rada, mora se uzeti i treći identičan primerak, koji se sa primerkom zapisnika o uzimanju uzoraka predaje podnosiocu zahteva.

Član 12

Uzorci za ispitivanje alkoholnih pića koja nisu u originalnom pakovanju, pakuju se u sudove koji garantuju očuvanje kvaliteta do momenta analize.

Član 13

Broj uzoraka zavisi od veličine proizvodne partije, a utvrđuje se na osnovu sledeće tabele.

Tabela 1

Alkoholna pića

Količina od koje se uzima uzorak

Broj uzoraka

Uzimanje uzoraka u originalnom pakovanju

 

 

a) broj ambalažnih jedinica

iz pošiljke do 100 ambalažnih jedinica

najmanje 1

b) broj ambalažnih jedinica

iz pošiljke od 100-500 ambalažnih jedinica

najmanje 2

v) broj ambalažnih jedinica

za svakih sledećih 500 ambalažnih jedinica

najmanje 2

Član 14

Ako ukupno uzeti uzorci alkoholnih pića iznose više od dva pojedinačna primerka - jedinice, obrazuje se jedan uzorak, s tim što svaki primerak može biti izdvojen za uzorak.

Član 15

Zapisnik o uzimanju uzoraka proizvoda obavezno sastavlja lice koje uzima uzorak za ispitivanje i u njega unosi podatke značajne za rezultat ispitivanja: mesto, datum i vreme uzimanja uzorka, svrha uzimanja uzorka, vrsta i količina proizvoda od kog se uzima uzorak, broj pojedinačno uzetih uzoraka i količina ukupno uzetog uzorka, oznake za identifikaciju uzorka i količina uzorka koji se dostavlja na ispitivanje.

Zapisnik potpisuju stručno lice koje uzima uzorak i predstavnik organizacije udruženog rada.

2. Metode hemijskih i fizičkih analiza alkoholnih pića

Član 16

Metode hemijskih i fizičkih analiza kojima se vrši kontrola kvaliteta alkoholnih pića obuhvataju:

1) određivanje sadržaja alkohola;

2) određivanje sadržaja ekstrakta;

3) određivanje ukupne titracione kiselosti;

4) određivanje sadržaja estara;

5) određivanje sadržaja metil-alkohola;

6) određivanje sadržaja viših alkohola;

7) određivanje sadržaja aldehida - volumetrijska metoda;

8) određivanje sadržaja furfurola;

9) određivanje sadržaja šećera;

10) ispitivanje frakcije destilata po Micko-u;

11) ispitivanje izdašnosti po Wüstenfeld-u;

12) određivanje sadržaja benzaldehida;

13) određivanje ukupne cijanovodonične kiseline (HCN).

Član 17

Ovaj pravilnik stupa na snagu po isteku tri meseca od dana objavljivanja u "Službenom listu SFRJ".

METODE HEMIJSKIH I FIZIČKIH ANALIZA ALKOHOLNIH PIĆA

1. Određivanje sadržaja alkohola

Sadržaj alkohola određuje se piknometrom i alkoholometrom.

A) Određivanje alkohola piknometrom na temperaturi 20°C

Princip

Određivanje alkohola piknometrom zasniva se na određivanju relativne gustine destilata, bez ekstrakta, temperature 20°C u odnosu na destilovanu vodu temperature 20°C. Na osnovu tako dobijene relativne gustine pročita se sadržaj alkohola iz tabele po Osborn-u (tabela 2).

Aparatura i pribor

Pored uobičajene laboratorijske opreme, koriste se i:

1) analitička vaga, sa tačnošću od ± 0,1 mg;

2) vodeno kupatilo, sa termostatom sa temperaturom od 20°C i tačnošću ± 0,05°C (za određivanje gustine);

3) aparat za destilaciju, koji se sastoji od destilacione boce od 250 ili 500 ml, produžnog nastavka, hladionika i levka koji dostiže do kraja posude;

4) odmerna tikvica od 100 ili 200 ml, baždarena na temperaturi od 20°C; piknometar sa šlifovanim zatvaračem.

Destilacija uzorka

1. Kod alkoholnih pića koja sadrže manje od 40 vol % alkohola odmeri se tačno 100 ml uzorka u odmernu tikvicu pri temperaturi od 20°C i kvantitativno prenese u balon za destilaciju. Odmerna tikvica se ispere tri puta sa 10 do 15 ml vode i sadržaj prebaci u balon za destilaciju. Zatim se doda nekoliko staklenih kuglica koje sprečavaju stvaranje pene i uređaj za destilaciju poveže. U istu odmernu tikvicu od 100 ml koja se koristi za prihvatanje destilata doda se 5 ml vode i namesti tako da kraj hladnjaka gotovo dodiruje vodu. Kad je predestilisano oko 20 ml, tikvica se postavi tako da završetak hladnjaka dođe malo ispod oznake kako bi alkohol (destilat) slobodno kapao u odmernu tikvicu. Kad je predestilisano oko 80 do 85 ml destilata, destilacija se prekida.

Odmerna tikvica sa alkoholom dopuni se vodom skoro do oznake, dobro promeša i prenese na vodeno kupatilo temperirano na tačno 20°C. U toku temperiranja od 30 minuta tikvica se dopuni do oznake, povremeno promeša i gustina destilata određuje onako kako je opisano u delu Određivanje gustine 20/20°C piknometrom. Količina alkohola u vol % očita se sa tabele 2, koja je odštampana uz ovaj pravilnik i čini njegov sastavni deo.

2. Kod alkoholnih pića koja sadrže više od 40 vol % alkohola, u baždarenu odmernu tikvicu ili piknometar od 50 ml odmeri se tačno uzorak alkoholnog pića pri temperaturi od 20°C, i prenese u balon za destilaciju od 250 ml. Odmerna tikvica ili piknometar se pri ovom prenošenju ispiraju vodom tako da na kraju u balonu za destilaciju bude oko 120 ml tečnosti. Destilat se prihvata u odmernu tikvicu ili piknometar od 100 ml. Nakon određivanja relativne gustine na temperaturi od 20°C, sadržaj alkohola se pročita iz tabele po Osborn-u, ali se dobijena vrednost množi faktorom koji se dobija iz odnosa tačno utvrđene i odmerne mase destilovane vode na temperaturi od 20°C u jednom i drugom piknometru. Taj faktor, odnosno kojeficijent biće oko 2.

Napomena: Alkoholni destilat koristi se za određivanje metil-alkohola, aldehida, furfurola, viših alkohola i estara, a ostatak za određivanje ekstrakta.

Određivanje

a) Masa praznog piknometra

Piknometar se napuni vrućom hrom-sumpornom kiselinom i ostavi da prenoći. Posle pražnjenja ispira se destilovanom vodom, a potom tri časa suši na temperaturi od 105 do 108°C. Piknometar se 30 minuta hladi u eksikatoru, a potom izmeri sa tačnošću na četvrtoj decimali. Masa praznog piknometra označava se sa "A" i izražava u gramima.

b) Određivanje vodene vrednosti piknometra

Piknometar se napuni sveže prokuvanom destilovanom vodom preko oznake, zatvori i prenese u vodeno kupatilo na temperaturu od 20°C da stoji 30 minuta. Pomoću kapilare vodena vrednost dovede se do oznake.

Napomena: Za vreme podešavanja piknometar treba da ostane u vodenom kupatilu. Slobodan deo piknometra očisti se štapićem od filtrir-papira.

Piknometar se ostavi pola časa u zatvorenom prostoru analitičke vage, zatim izmeri na analitičkoj vagi, sa tačnošću na četvrtoj decimali. Masa piknometra sa vodom označava se sa "B".

Napomena: Prazan piknometar i piknometar sa vodom meri se tri puta, a za obračun se uzima srednja vrednost.

Određivanje alkohola

Piknometar se isplakne tri do četiri puta rastvorom pripremljenog uzorka, napuni preko oznake i prenese u vodeno kupatilo na temperaturi od 20°C da stoji 30 minuta. Pomoću kapilare izravna se nivo rastvora do oznake, a zatim se piknometar izmeri i utvrdi se vrednost sa tačnošću na četvrtoj decimali. Dobijena vrednost se označava sa "C".

Izračunavanje

a) Masa piknometra sa vodom izračunava se po sledećoj formuli:

g = B - A

gde je:

B - masa piknometra sa vodom

A - masa praznog piknometra

b) Gustina alkohola (20/20°C) izračunava se po sledećoj formuli:

Gustina =  

C - A

  

B - A

  

gde je:

C - masa piknometra sa alkoholom

B - masa piknometra sa vodom

Izražavanje rezultata

Kod alkoholnih pića koja sadrže manje od 45 vol % alkohola vrednost se izražava u vol % sa dve decimale. Tačnost rezultata iznosi ± 0,05 vol %.

B) Određivanje alkohola alkoholometrom

Princip i primena

Princip se zasniva na određivanju alkohola alkoholometrom sa podelom od 0,1 vol % na temperaturi od 20°C, proverene ispravnosti. Kod bezbojnih pića koja nemaju ekstrakt alkohol se određuje direktno alkoholometrom.

Aparatura i pribor

Pored uobičajene laboratorijske opreme, koriste se i:

1) balon za destilaciju od 500 ml;

2) odmerna tikvica od 250 ml;

3) produžni levak;

4) alkoholometar sa podelom od 0,1 vol %.

Određivanje

Kod bezbojnih pića koja nemaju ekstrakt alkohol se određuje direktno alkoholometrom. Kod pića koja nemaju samo alkoholno-vodene mešavine već i ekstrakt (sve neisparljive komponente) mora se izvršiti destilacija i jačina odrediti u čistom destilatu. Prilikom destilacije mora se voditi računa o tome da može doći do gubitka alkohola.

Uzme se 250 ml uzorka termostatiranog na 20°C za vreme od 30 minuta i kvantitativno prenese u balon za destilaciju, uz ispiranje tri puta sa po 15 ml destilisane vode.

Destilacija treba da se završi za 80 do 90 minuta, a destilat da se sliva niz produžni levak. Destiliše se sve dok ne ostane 10 do 12 cm3 prostora do oznake odmerne tikvice. Destilacija se prekida, tikvica se dopuni destilisanom vodom do oznake i posle termostatiranja u vodenom kupatilu na 20°C za vreme od 30 minuta određuje se procent alkohola alkoholometrom. Na alkoholometru se očita procent alkohola, a iz odgovarajućih tabela se pročita vrednost stvarnog sadržaja alkohola, u procentima.

2. Određivanje sadržaja ekstrakta

Princip i primena

Princip se zasniva na postupku direktnog uparavanja alkoholnog pića na vodenom kupatilu i dopunskom sušenju u sušnici na 105°C do konstantne mase.

Ovaj princip se primenjuje za određivanje ekstrakta u alkoholnim pićima sa manjim sadržajem ekstrakta.

Kod alkoholnih pića sa većim sadržajem ekstrakta određivanje ekstrakta vrši se iz gustine ostatka posle destilacije.

Aparatura i pribor

Pored uobičajene laboratorijske opreme, koriste se i:

1) platinska ili porculanska posuda sa ravnim dnom;

2) pipeta od 25 ml;

3) vodeno kupatilo;

4) laboratorijska sušnica;

5) eksikator sa sredstvom za sušenje;

6) analitička vaga;

7) termostat.

U platinsku ili porculansku posudu izmerenu na analitičkoj vagi sipa se 10 do 15 ml termostatiranog alkoholnog pića i stavi na vodeno kupatilo da lagano isparava. Kad potpuno ispari, ostavi se 2 časa u sušnicu na 105°C. Nakon završenog sušenja uzorak se prenese u eksikator, ohladi se i izmeri.

Izračunavanje

Količina ekstrakta izražava se u g/l pića i izračunava se po sledećoj formuli:

Ekstrakt, g/l = (m1 - m2)  ·  

1000

 

ml uzroka

 

gde je:

m1 - masa posude sa ekstraktom, u gramima;

m2 - masa prazne posude, u gramima.

Rezultati se daju sa jednom decimalom.

3. Određivanje ukupne titracione kiselosti

Princip i primena

Ovaj princip se zasniva na titraciji alkoholnih pića sa 0,1 mol/l rastvorom natrijum-hidroksida uz fenolftalein kao indikator.

Princip se primenjuje za određivanje ukupnih kiselina kod svih vrsta alkoholnih pića.

Aparatura i pribor

Pored uobičajene laboratorijske opreme, koriste se i:

1) pipeta od 25, 50 ili 100 ml;

2) erlenmajer-tikvica od 250 ml;

3) bireta;

4) aparat sa povratnim hladnjakom.

Reagensi

- natrijum-hidroksid, rastvor, c(NaOH) = 0,1 mol/l;

- 1% rastvor fenolftaleina u etanolu.

Određivanje

Uzme se 50 ili 100 ml uzorka, prenese u erlenmajer-tikvicu od 250 ml, doda 15 - 20 ml destilovane vode i kuva 10 minuta u aparatu sa povratnim hladnjakom radi odstranjivanja ugljene kiseline. Potom se erlenmajer-tikvica sa uzorkom zatvori odgovarajućim zapušačem i ohladi pod mlazom vode. Zatim se rastvoru dodaju dve kapi rastvora fenolftaleina i titrira sa 0,1 mol/l rastvora natrijum-hidroksida do pojave ružičaste boje koja mora biti stabilna 15 sekundi.

Napomena: Kod uzorka sa niskim količinama kiselina titriranje se mora vršiti sa 0,02 mol/l rastvorom natrijum-hidroksida.

Izračunavanje

Ukupna količina titrirljivih kiselina izražava se u miligramima sirćetne kiseline na litar pića, po sledećoj formuli:

Ukupna količina titrirljivih kiselina =  

6 · a · f ·  

1000

  

ml uzorka

  

 

a ako se koristi 0,02 mol/l =  

1,2 · a · f ·  

1000

 

ml uzroka

  

gde je:

a - utrošen broj ml, 0,1 mol/l rastvora natrijum-hidroksida

f - faktor 0,1 mol/l rastvora natrijum-hidroksida

Ponovljivost

Razlika između rezultata dva određivanja izvršenih paralelno ili ubrzo jedno za drugim ne sme prelaziti ± 5 mg/l.

4. Određivanje sadržaja estara

Princip i primena

Princip se zasniva na neutralizaciji kiselina i saponifikaciji estara u baznoj sredini. Retitracija se vrši hlorovodoničnom kiselinom uz fenolftalein kao indikator.

Metoda se primenjuje za određivanje estara kod svih alkoholnih pića kojima se jačina svodi na 30 vol %.

Aparatura i pribor

Pored uobičajene laboratorijske opreme, koriste se i:

1) vodeno kupatilo;

2) pipeta od 50 ml;

3) pipeta od 25 ml;

4) laboratorijska čaša;  

5) aparat za destilaciju sa pripadajućim delovima.

Reagensi

- natrijum-hidroksid, rastvor, c(NaOH) = 0,1 mol/l

- 1% rastvor fenolftaleina u etanolu

- hlorovodonična kiselina, rastvor c(HCl) = 0,1 mol/l

Određivanje

Alkoholna pića koja se analiziraju moraju se najpre neutralisati, u prisustvu fenolftaleina 0,1 mol rastvorom natrijum-hidroksida, pa zatim destilisati, a estri se određuju iz dobijenog destilata.

Zavisno od količine estra u piću, prilagodi se potrebna količina baze. Uobičajeno je da potrebna količina 0,1 mol/l rastvora baze (NaOH) bude:

1) za rum, destilat oko 8 do 10 ml;

2) za destilate iz koštičavog voća oko 15 ml;

3) za šljivovicu, viljamovku oko 20 do 30 ml.

Količina pripremljenog rastvora natrijum-hidroksida mora biti tako odmerena da se za retitraciju upotrebi najmanje 3 ml, a najviše 10 ml 0,1 mol/l rastvora kiseline.

Odmeri se tačno 50 ml neutralisanog destilata, uz upotrebu fenolftaleina, a zatim se u erlenmajer-tikvicu dodaje višak količine rastvora 0,1 mol/l natrijum-hidroksida.

Posle dodavanja staklenih kuglica, rastvor se ostavi da umereno ključa 30 minuta na vodenom kupatilu, uz korišćenje povratnog hladionika. Nakon brzog hlađenja titrira se sa 0,1 mol rastvora hlorovodonične kiseline.

Napomena: U slučaju manjih količina estara mora se upotrebiti 0,02 mol/l kiselina i baza.

Izračunavanje

Količina estara izražava se u mg/l apsolutnog alkohola kao etil-acetat.

Količina estara izračunava se prema utrošku natrijum-hidroksida za saponifikaciju, odnosno neutralizaciju.

a) Izračunavanje koeficijenta

1 ml 0,1 mol/l rastvora natrijum-hidroksida odgovara 8,8 mg etil-acetata.

b) Izračunavanje količine estara

estara, mg/l a.a.   =  

8,8 · 20 · (a · f1 - b · f2)

  · 100

 

A

gde je:

a - utrošen broj ml 0,1 mol/l rastvora natrijum-hidroksida

b - utrošen broj ml 0,1 mol/l rastvora hlorovodonične kiseline za retitraciju

f1 - faktor 0,1 mol/l rastvora natrijum-hidroksida

f2 - faktor 0,1 mol/l rastvora hlorovodonične kiseline

A - količina alkohola u uzorku, u vol%

Ponovljivost

Razlika između rezultata dva određivanja izvršenih paralelno ili ubrzo jedno za drugim ne sme prelaziti ± 3% stvarne vrednosti.

Napomena: Obavezno je da se na isti način tretira i kontroliše uzorak koji se sastoji od 50 ml 30 % apsolutnog etanola, a pri obračunavanju količine estara mora se izvršiti odgovarajuća korekcija, koja može da bude i vrlo značajna, naročito kada 0,1 mol rastvora natrijum-hidroksida nije tačno pripremljen ili ako nije dobro zaštićen od uticaja ugljene kiseline.

5. Određivanje sadržaja metil-alkohola

Princip i primena

Princip se zasniva na oksidaciji metil-alkohola u kiseloj sredini do formaldehida. Za određivanje formaldehida koriste se kolorimetrijske metode, jer formaldehid sa odgovarajućim reaktivima daje obojeni kompleks čiji intenzitet zavisi od količine metil-alkohola.

Metoda određivanja metil-alkohola primenjuje se kod svih alkoholnih pića.

Aparatura i pribor

Pored uobičajene laboratorijske opreme, koriste se i:

1) epruvete sa šlifovanim zatvaračem od 50 ml;

2) vodeno kupatilo, sa regulisanom temperaturom od 70°C ± 1°C;

3) spektrofotometar;

4) analitička vaga;

5) odmerna tikvica od 100 ml;

6) graduisane pipete;

7) aparat za destilaciju sa povratnim hladnjakom, balonom za destilaciju od 100 ml i sa pripadajućim delovima.

Reagensi

- rastvor natrijum-sulfita (Na2SO3), zasićen;

- sumporna kiselina, koncentrovana (H2SO4 = r20 = 1,84 g/ml);

- rastvor sumporne kiseline 1 + 3 (jedan deo sumporne kiseline u tri dela vode);

- 1% rastvor kalijum-permanganata (KMnO4);

- 2% rastvor hromotropne kiseline u vodi (2,7 C10H8O8 S2 · 2 H2O), relativna molekulska masa 356,34 g.

Rastvor se čuva na hladnom;

- 2,5% rastvor prečišćenog etanola;

- etanol, 100%.

Napomene:

a) Čista hromotropna kiselina, pripremljena za upotrebu, mora da daje neznatno obojenje. Ako kiselina nije čista, prečišćava se na sledeći način: rastvori se 10 g hromotropne kiseline u 25 ml destilovane vode (ako se radi sa natrijumovom solju hromotropne kiseline dodaje se 2 ml sumporne kiseline), zatim se dodaje 50 ml metanola, zagreva do ključanja, filtrira i doda 100 ml izo-propil-alkohola radi taloženja kiseline koja kristališe, a potom se suši na hladnom.

b) Proba reakcije: jedna kap FeCl3 u 10 ml hromotropne kiseline (0,1 g u 1000 ml H2O) daje zeleno obojenje.

v) Test osetljivosti: 0,5 ml formaldehida razredi se sa 1000 ml vode - rastvor formaldehida.

U 5 ml rastvora 0,05% hromotropne kiseline (0,05% rastvor hromotropne kiseline u 75% H2SO4) dodaje se 0,1 ml rastvora formaldehida i zagreva 20 minuta na temperaturi od 70°C. Treba da se pojavi ljubičasto obojenje.

g) Prečišćavanje metil-alkohola vrši se tako što metil-alkohol ključa sa baritom nekoliko časova. Zatim se izvrši rektifikacija i sledeća frakcija (srce) koristi se za pripremu standardnog rastvora metil-alkohola.

d) Ako etil-alkohol koji se koristi za razređenje sa hromotropnom kiselinom daje obojenje, znači da sadrži tragove metil-alkohola. U tom slučaju se vrši prečišćavanje, destilacijom etil-alkohola sa anhidrovanim baritom ili živim krečom. Dobijeni destilat se stavlja na laganu rektifikaciju; 3/5 prvog destilata se odbaci i prihvati 2/5 destilata od koga se prave razblaženja za određivanje metil-alkohola.

Postupak određivanja

Priprema kontrolnog uzorka

U epruvetu sa šlifovanim zatvaračem, od 50 ml, odmeri se 2,5 ml 2,5% etanola.

Priprema uzorka pića

Alkoholna pića kod kojih se određuje metil-alkohol treba predestilovati vodeći računa da se izbegne gubitak alkohola. Određeni broj uzorka kod kojih je određen procent alkohola svodi se na 2,5 vol% etil-alkohola.

Priprema osnovnog i standardnog rastvora

Osnovni rastvor priprema se tako što se u odmernu tikvicu od 100 ml doda 1 ml 100% metanola i dopuni sa 2,5% rastvorom etanola do oznake, uz dobro mešanje i temperiranje na 20°C.

Od osnovnog rastvora pripremaju se standardni rastvori tako što se u odmerne talone od 100 ml dodaje osnovni rastvor u sledećim količinama: 0,25 ml; 1,0 ml; 1,75 ml; 2,5 ml; 3,5 ml i 4,0 ml i dopuni sa 2,5% etil-alkoholom na sledeći način:

I

1‰

  - 0,25 ml

osnovnog rastvora

± 99,75 ml

2,5‰ etil-alkohola

II

4‰

  - 1,0 ml

"

± 99,0 ml

2,5‰ etil-alkohola

III

7‰

  - 1,75 ml

"

± 98,25 ml

2,5% etil-alkohola

IV

10‰

  - 2,5 ml

"

± 97,5 ml

2,5% etil-alkohola

V

13‰

  - 3,5 ml

"

± 96,75 ml

2,5% etil-alkohola

VI

16‰

  - 4,0 ml

"

± 96,0 ml

2,5% etil-alkohola

Način određivanja

Uz pripremljene epruvete sa šlifovanim zatvaračem od oko 50 ml, obeležene sa: K, I, II, III, IV, V i VI (za standardne rastvore), pripremaju se i epruvete za uzorke pića obeležene arapskim brojevima od 1 pa nadalje, zavisno od broja uzoraka.

U epruvete se unose rastvori na sledeći način:

K - 2,5 ml 2,5% - etil-alkohola (kontrola)

I - 2,5 ml 1,50‰ - (promil) standardnog rastvora metil-alkohola u 2,5% etanolu

II - 2,5 ml 4‰ - (promil) standardnog rastvora metil-alkohola u 2,5% etanolu

III - 2,5 ml 7‰ - (promil) standardnog rastvora metil-alkohola u 2,5% etanolu

IV - 2,5 ml 10‰ - (promil) standardnog rastvora metil-alkohola u 2,5% etanolu

V - 2,5 ml 13‰ - (promil) standardnog rastvora metil-alkohola u 2,5% etanolu

VI - 2,5 ml 16‰ - (promil) standardnog rastvora metil-alkohola u 2,5% etanolu

1 - 2,5 ml uzorka alkoholnog pića svedenog na 2,5 vol % etanola vodom

2, 3, 4, itd. uzorka alkoholnog pića svedenog na 2,5 vol % etanola vodom

U svaku epruvetu dodaju se sledeći reagensi:

1 ml sumporne kiseline (1 + 3)

1 ml 1% vodenog rastvora kalijum-permanganata promeša se i ostavi da stoji tačno 10 minuta, radi oksidacije metil-alkohola do formaldehida, a zatim se dodaje po 1-3 kapi zasićenog vodenog rastvora natrijum-sulfita dok se rastvor ne obezboji, odnosno dok se ne ukloni višak kalijum-permanganata. Sadržaj u epruveti se promeša, pa se doda: 0,5 ml 2% hromotropne kiseline (natrijumove soli) ponovo se promeša i na kraju doda 5 ml koncentrovane sumporne kiseline, posle čega se meša u krug (bez izvrtanja) nekoliko puta, pri čemu se vodi računa da se sadržaj u svakoj epruveti meša na isti način.

Nakon toga epruveta se stavlja u već pripremljeno ključalo vodeno kupatilo, uključi štoperica i nastavi sa dodavanjem hromotropne i sumporne kiseline u svaku od sledećih epruveta. Pri tom se mora voditi računa da svaka epruveta sa sadržajem ostane u ključalom vodenom kupatilu tačno 20 minuta. Pošto prođe 20 minuta, epruvete se vade iz vodenog kupatila, skidaju šlifovani zatvarači i stavljaju u sud sa hladnom vodom. Nakon hlađenja do sobne temperature očitava se optička gustina (A%) obojenog kompleksa na 570 nm u staklenoj kiveti prečnika 10 mm.

Priprema dijagrama

Na apscisi se označe koncentracije rastvora, a na ordinati vrednosti ekstinkcije. Konstruiše se standardni dijagram iz kog se očitava sadržaj metil-alkohola, koji se izražava u vol % apsolutnog alkohola.

Očitavanje

I Kontrolni uzorak E = 0,00

II Standardni rastvori

1. E = 0,16 - 1‰

2. E = 0,58 - 4‰

3. E = 1,00 -7‰

4. E = 1,44 - 10‰

5. E = 1,83 - 13‰

6. E = 2 - 16‰

6. Određivanje sadržaja viših alkohola

Princip i primena

Princip se zasniva na oslobađanju alkoholnih pića (destilacijom) od aldehida i kiselina i određivanju viših alkohola kolorimetrijskom metodom uz paradimetil-aminobenzaldehid kao reaktiv.

Aparatura i pribor

Pored uobičajene laboratorijske opreme, koriste se i:

1) balon za destilaciju, sa pripadajućim delovima;

2) odmerna pipeta od 1 ml i graduisana od 5 ml;

3) odmerna pipeta od 20 ml;

4) vodeno kupatilo;

5) epruvete od vatrostalnog stakla sa šlifovanim zatvaračem;

6) spektrofotometar;

7) odmerna tikvica od 50 ml i 100 ml;

8) analitička vaga.

Reagensi

- koncentrovana sumporna kiselina H2SO4 (r20 = 1,84 g/ml)

- izo-amil-alkohol p.a.

- izo-butil-alkohol p.a.

- etil-alkohol 100%

- paradimetil-aminobenzaldehid p.a.

Postupak određivanja

Uzorak alkoholnog pića treba obavezno prethodno destilisati, pa iz dobijenog destilata uzeti probu za analizu.

Priprema matičnog rastvora i standarda

Promeša se 4 ml izo-amil-alkohola i 1 ml izo-butil-alkohola, odmeri na analitičkoj vagi tačno 1 g te mešavine i kvantitativno prenese u odmernu tikvicu od 100 ml. Tikvica se dopuni do oznake 5% rastvorom etanola u vodi. Temperatura rastvora se dovede na 20°C i dalje održava. Standardi se primenjuju isto kao prilikom određivanja metanola, a razlika je u tome što se ovde matični rastvor dopuni 5% etanolom do oznake.

Za pripremu standarda od 50, 100, 150, 200, 250 µg po jednom mililitru uzima se od 1% matičnog rastvora za više alkohole:

0,5 ml i dopuni do 100 ml sa 5% etanolom 50 µg/1 ml

1,0 ml i dopuni do 100 ml sa 5% etanolom 100 µg/1 ml

1,5 ml i dopuni do 100 ml sa 5% etanolom 150 µg/1 ml

2,0 ml i dopuni do 100 ml sa 5% etanolom 200 µg/1 ml

2,5 ml i dopuni do 100 ml sa 5% etanolom 250 µg/1 ml

Priprema uzorka i standarda za analizu

Priprema se onoliko staklenih epruveta koliko je standardnih rastvora i uzorka pića za ispitivanje. U svaku epruvetu sa šlifovanim zatvaračem ulije se redom po 5 ml standardnog rastvora i uzorka svedenog na 5% etanol. Zatim se doda po 1 ml 0,5% natrijum-hidroksil-amin-hidrohlorida (3,5 g/100 ml vode). Epruvete se dobro zatvore, promešaju i ostave da stoje 15 minuta.

Način određivanja

Pipetom se uzme 1 ml destilata, prenese u epruvetu, doda 20 ml koncentrovane sumporne kiseline u kojoj je rastvoreno 500 mg/l paradimetil-amino-benzaldehida. Ovaj reaktiv treba da bude pripremljen za svaku seriju određivanja. Epruvete se mućkaju zaronjene u ledenu vodu za sve vreme dodavanja reaktiva. Zatim se epruvete 20 minuta zagrevaju u ključalom vodenom kupatilu. Nakon nekoliko minuta zagrevanja epruvete se promućkaju da se bojeni produkti ne koncentrišu samo na površini. Nakon 20 minuta, epruvete sa uzorcima se brzo rashlade u ledenoj vodi dok se ne postigne sobna temperatura, a zatim se meri intenzitet obojenja pomoću spektrofotometra na talasnoj dužini od 530 mm ili od 536 nm.

Sadržaj viših alkohola izražava se u mg/l apsolutnog alkohola i dobija na sledeći način:

sadržaj viših alkohola, mg/l a.a. =  

A · 20 · 1000

 

1000

 

gde je:

A - količina viših alkohola očitana ka krivoj

20 - razblaženje (100 : 5).

7. Određivanje sadržaja aldehida

Volumetrijska metoda

Princip i primena

Princip određivanja ukupnih aldehida zasniva se na hidrolizi acetila u razblaženom slabo kiselom rastvoru, potpunom vezivanju aldehida u neutralnoj sredini na sumporastu kiselinu u suvišku, pa zatim oksidovanju suvišne, nevezane, sumporaste kiseline rastvorom joda u kiseloj sredini i na kraju se titracijom odredi oslobođena sumporasta kiselina (kod pH-9) koja je bila vezana za aldehide.

Aparatura i pribor

Za primenu ove metode koristi se uobičajena laboratorijska oprema.

Reagensi

Rastvor A

- kalijum-disulfit (kalijum-metabisulfid)

15 g

- čista hlorovodonična kiselina (r = 1,18)

70 cm3

- voda

do 1000 cm3

Za oksidaciju 10 cm3 ovog rastvora mora se upotrebiti manje od 24 cm3 rastvora joda koncentracije  

c (

1

J2

  ) = 0,1 mol/l.

2

Rastvor B

Komplekson III

5g/l

Rastvor C

- monokalijum-fosfat

71,7 g

- natrijum-hidroksid

42 g

- voda

do 1000 cm3

Doterati pH-vrednost jednakih zapremina rastvora A i rastvora C da iznosi 6,8: brometil-plavo mora preći u zelenu ili zelenoplavu boju pri dodatku male količine kiseline ili natrijum-hidroksida koji se dodaju rastvoru A.

Rastvor D

- hlorovodonična kiselina (r = 1,8)

250 cm3

- voda

do 1000 cm3

Rastvor E

- borna kiselina

100 g

- natrijum-hidroksid

170 g

- voda

do 1000 cm3

Neutralnom rastvoru jednakih delova rastvora A i C koji su izmešani, dodaje se ista zapremina rastvora D i E. pH-vrednost mora biti između 8,9 i 9 (kad se doda fenolftalein, rastvor je bledoružičaste boje). Ako je prelaz boje fenolftaleina suviše oštar, rastvoru D dodaje se mala količina hlorovodonične kiseline, a ako je neznatno obojen, rastvoru E dodaje se mala količina natrijum-hidroksida.

Rastvor skroba: 5 g skroba/l stabilizuje se sa malom količinom živinog jodida. Rastvor se može čuvati šest meseci. Može se isto tako koristiti natrijum-hlorid (200 g/l) radi stabilizovanja rastvora skroba.

- standardni rastvor joda c (

1

 J2)  =

  0,1 mol/l. *

 

2

* Ranije 0,1 N

Određivanje

A) Ukupni aldehidi

U odmernu bocu od 500 cm3, sa šlifovanim zatvaračem, stavi se 300 cm3 ključale vode, 10 cm3 rastvora A, 10 cm3 rastvora B i 50 cm3 50% destilata, promeša se i ostavi da stoji 15 minuta. Doda se 10 cm3 rastvora C, promeša se i ostavi da stoji 15 minuta. Zatim se doda 10 cm3 rastvora D i 3 - 4 cm3 rastvora skroba, pa se oprezno iz birete dodaje 0,1 mol rastvora joda do pojave plavoljubičaste boje. Posle pojave ove boje doda se 10 cm3 rastvora E, pri čemu plavoljubičasta boja nestaje. Oslobođena sumporasta kiselina, koja je bila vezana za aldehide, titrira se 0,1 mol rastvorom joda, do pojave plavoljubičaste boje. Utrošak joda se obeleži sa N.

1 mol. 0.1 M = 2,2 mg acetaldehida. Sadržaj acetaldehida u jednom litru destilata = 2,2 · 40 · N.

B) Slobodni aldehidi

Pošto se acetili za vreme destilacije kod pH ispod 9 samo delimično razgrađuju, mora se vršiti specijalna destilacija iz alkalne sredine. To važi samo za određivanje slobodnih aldehida, a sastoji se u sledećem: u balon od 200 cm3 stavi se 50 cm3 uzorka alkoholnog pića i 5 cm3 0,1 mol rastvora natrijum-hidroksida i destiliše tako što se 40 do 50 cm3 destilata stavi u balon od 250 cm3, u kome se već nalazi 100 cm3 prokuvane destilisane vode, 10 cm3 rastvora A, 10 cm3 rastvora B i 10 cm3 rastvora C. Sve se promeša i ostavi da stoji 15 minuta, a onda se aldehidi određuju na isti način kako je opisano kod ukupnih aldehida.

Količina slobodnih aldehida izražena u mg etanala (acetaldehida) na litar alkoholnog pića izračunava se po sledećoj formuli:

Etanal = 44 · n

Ako se želi da sadržaj etanala bude izražen na litar apsolutnog alkohola, uzima se sledeća formula:

Etanal = 44 · n · 

100

  

A

  

gde je A = vol % alkohola u uzetoj probi (uzorku)

n = broj ml utrošenog rastvora joda.

8. Određivanje sadržaja furfurola

Princip i primena

Ovaj princip zasniva se na merenju intenziteta obojenog kompleksa na 518 nm koji stvara furfurol sa anilinom u prisustvu sirćetne kiseline.

Aparatura i pribor

Pored uobičajene laboratorijske opreme, koriste se i:

1) graduisana pipeta od 1 ml;

2) epruvete;

3) spektrofotometar.

Reagensi

- dinatrijum-hidrogen-fosfat - Na2HPO4 · 2H2O

- 40% etil-alkohol

- sirćetna kiselina (CH3COOH)

- anilin, sveže predestilovan

- natrijum-hlorid - NaCl

- oksalna kiselina - C2H2O4 · 2H2O

- mešani reaktiv (sastoji se iz rastvora A i rastvora B).

Rastvor A i rastvor B pripremaju se posebno, pa se pomešaju i filtriraju kroz grubi filtrir-papir. Rastvor pripremljen na taj način je vrlo stabilan.

Pripremanje rastvora A: U čist sud odmeri se 50 ml sveže destilisanog anilina i doda se 500 ml koncentrovane sirćetne ledene kiseline.

Pripremanje rastvora B: U čist sud odmeri se 100 ml 5% vodenog rastvora natrijum-hidrogen-fosfata, zatim 50 ml vodenog rastvora 5% oksalne kiseline i na kraju 300 ml 7,5% vodenog rastvora natrijum-hlorida.

Mešani reaktiv se čuva u mračnoj prostoriji u boci tamne boje.

Određivanje

Priprema standardnih rastvora furfurola

Rastvori se 1 g sveže destilovanog furfurola u 1000 ml destilovane vode. Od pripremljenog rastvora uzme se 10 ml i ponovo dopuni destilovanom vodom do 100 ml. Od ovako razblaženog rastvora uzima se redom po 0,5, 1,0, 3,0, 5,0, 7,0 i 9,0 ml i dopuni vodom u odmernim balonima od 100 ml. Ovi rastvori odgovaraju količini od 0,5, 1, 3, 5, 7 i 9 mg/l furfurola.

Kao slepa proba služi destilovana voda.

Način određivanja

Za analizu se uzima 1,0 ml slepe probe, standardnog rastvora ili uzorka koji je prethodno predestilisan i tome doda po 10,0 ml mešanog reaktiva. Epruveta se zatvori, dobro promućka i ostavi da stoji 45 do 60 minuta. Nakon toga vrši se očitavanje na spektrofotometru na talasnoj dužini od 518 nm.

Izračunavanje

Iz očitavanja baždarene krive dobije se sadržaj furfurola u mg/l uzorka pića.

Sadržaj furfurola izražava se u mg/l a.a. i dobija se po sledećoj formuli:

Sadržaj furfurola u mg/l a.a. =  

E · 16,67 ·  

100

  gde je:

  

A

E = optička gustina obojenog rastvora ili (A%) na 518 nm

A = vol% alkohola u ispitivanom uzorku

16,67 = faktor utvrđen na osnovu merenja većeg broja standardnih rastvora poznate koncentracije, a dobija se sa baždarene krive iz odnosa vrednosti sa apscise i ordinate. Faktor zavisi od tipa spektrofotometra.

9. Određivanje sadržaja šećera

Gravimetrijska metoda

Princip i primena

Princip se zasniva na svojstvu da direktno redukujući šećeri pod određenim uslovima vrše redukciju Felingovog rastvora, a nastali bakar-oksidul se određuje gravimetrijski.

Aparatura i pribor

Pored uobičajene laboratorijske opreme, koriste se i:

1) čaša od 250 ml;

2) erlenmajer-tikvica od 300 ml;

3) odmerna tikvica od 100, 200 i 1000 ml;

4) pipeta od 5, 10 i 25 ml;

5) graduisane pipete od 2 ml;

6) porculanski lončić za filtriranje ili stakleni guč;

7) analitička vaga;

8) vodeno kupatilo.

Reagensi

- natrijum-hidroksid, rastvor c (NaOH) = 1 mol/l: Carrez I : 15 g K4Fe (CN)6 · 3H2O rastvori se u 100 ml destilovane vode

- Carrez II: odmeri se 30 g ZnSO4 i rastvori u 100 ml destilovane vode

- Fehling I: odmeri se 70,0 g CuSO4 · 5H2O (čist, prekristalisan), rastvori u vodi, dopuni do 1000 ml, a zatim profiltrira kroz azbestni filtar

- Fehling II: odmeri se 346 g kalijum-natrijum-tartarata koji kristališe sa 4 molekula vode i 103,2 g natrijum-hidroksida, rastvori u vodi i dopuni do 1000 ml. Posle dva dana rastvor se profiltrira kroz azbestni filtar

- hlorovodonična kiselina, koncentrovana, r20 = 1,19 g/ml.

Određivanje

Pipetom se uzme tačno 25 ml ispitivanog uzorka i kvantitativno prenese u odmernu tikvicu od 250 ml, dopuni se do oznake i dobro promućka. Zatim se odmeri 10 ml rastvora i otpipetira se u odmernu tikvicu od 100 ml, doda se 0,5 cm3 koncentrovane hlorovodonične kiseline za inverziju i 5 ml vode. Inverzija se vrši pola časa na vodenom kupatilu na temperaturi od 68 do 70°C. Posle toga proba se ohladi i neutrališe sa 1 mol/l rastvorom natrijum-hidroksida, kap po kap, do slabo alkalne reakcije uz lakmus-papir. Nakon neutralizacije doda se, radi bistrenja, 1 ml rastvora Carrez I i 1 ml rastvora Carrez II, dopuni se vodom do oznake i izmućka. Taloženje traje 1 čas, posle čega se profiltrira i dalje radi po sledećem postupku: u erlenmajer-tikvicu od 300 ml sipa se 25 ml filtrata, 25 ml destilovane vode, 25 ml Fehling I i 25 ml Fehling II i stavi da ključa. Posle ključanja od tačno 2 minuta skida se sa vatre, u erlenmajer-tikvicu sipa se 100 ml hladne destilovane vode i filtrira kroz lončić G4. Lončić prethodno mora biti opran, osušen i izmeren. Talog u lončiću se ispere toplom vodom, alkoholom i etrom. Suši se u termostatu 10 minuta na 105°C, stavi u eksikator da se ohladi i nakon 30 minuta meri.

Izračunavanje

Sadržaj šećera u piću izražava se u g/l i izračunava pomoću sledeće formule:

ukupni Cu2O = lončić sa talogom - prazan lončić

Iz odgovarajuće tabele očita se iz kolone Cu2O ukupni invert u mg, u količini koja je taložena, tj. u 0,25 g, odnosno 0,50 g probe.

Ukupni invert g/l = očitani mg · 4000 ako je uzeto 0,25 ml probe, odnosno ukupni invert g/l = očitani mg · 2000 ako je uzeto 0,50 ml probe.

10. Ispitivanje frakcije destilata po Micko-u

Princip i primena

Princip se zasniva na frakcionoj destilaciji pića i određivanju arome u dobijenim frakcijama.

Aparatura i pribor

Pored uobičajene laboratorijske opreme, koriste se i:

- brušena aparatura sastavljena od balona za destilaciju i dvostrukog cevnog nastavka, sa nagnutim hladnjakom;

- odmerni baloni od 25 ml;

- čašice za probu.

Određivanje

Količina od  

9600 ml

  pića koje se ispituje (a = sadržaj alkohola u vol%)

a

izmeri se i uz primenu brušenih nastavaka destiliše dok se ne dobije 240 ml destilata. Ovom destilacijom dobije se šest frakcija, svaka po 25 ml, koje se ispituju na miris i ukus. Brzinu destilacije treba podesiti tako da se na svakih 15 minuta dobije 25 ml destilata, koji se hvataju u numerisane odmerne balone od 25 ml.

U prvoj frakciji destilata pored aldehida pojavljuju se i lako isparljive aromatične materije, pretežno etil-acetat. Tipične vinske aromatične materije nalaze se uglavnom u drugoj, trećoj i četvrtoj, a ponekad i u petoj frakciji. Šesta frakcija, koja se može probati bez razblaženja, po pravilu je vodenog ukusa, a ponekad, ako destilat sadrži veće količine kiseline, kiselkastog ukusa. Neprijatan ukus na nečisto vrenje, plesnivost, zagorelost ili stranu aromu obično se sreće do četvrte frakcije destilata.

Po 20 ml frakcija od 1 do 6 (5 ml služi za ispitivanje izdašnosti) prenese se u čašice za probu i prve tri frakcije razblaže se duplom zapreminom vode, a frakcije 4,5 i 6 - istom zapreminom čiste vode tempirane na 20°C. Posle dva časa sadržaj u čašicama se dobro izmeša i ispita na miris i ukus.

Tipične vinske arome ocenjuju se prema jačini i čistoći.

Ispitivanje frakcije po Mickou ne može biti jedina osnova za davanje ocene o piću.

11. Ispitivanje izdašnosti po Wünstenfeldu

Određivanje

Od frakcije 2 do 5 uzme se po 5 ml, sipa u jedan odmerni balon od 100 ml i dopuni vodom koja nema strani miris i ukus. Posle mešanja otpipetira se u osam čašica za probu redom po 0,1, 0,2, 0,3, 0,5, 0,6, 0,7, 1,0 i 1,5 ml mešavine i dopuni vodom do 100 ml. Upotrebljenim količinama destilata odgovaraju, približno, ova razblaženja:

0,1 ml oko 1 + 2000

0,2 ml oko 1 + 1000

0,3 ml oko 1+ 700

0,4 ml oko 1 + 500

0,5 ml oko 1 + 400

0,7 ml oko 1 + 300

1,0 ml oko 1 + 200

1,5 ml oko 1 + 140

Posle mešanja uzorci se ostave dva časa. Zatim se izvrši ocenjivanje počev od najvećeg razblaženja, da bi se ustanovilo u kojoj čaši se najpre pojavljuju jasno izražene karakteristične buketne materije. Granica njihove pojave pokazuje izdašnost proizvoda.

Ako jedno razblaženje pokazuje vodenast ukus, a sledeće malu ali već jasnu aromu, može se smatrati da se ta aroma pojavljuje između dva razblaženja. Tada se i izdašnost ocenjuje kao srednja vrednost.

Važno je da se ispitivanje na izdašnost može obaviti najranije jedan sat posle ispitivanja destilata na ukus i miris. Pri tom treba uzeti u obzir samo karakteristične buketne materije, a ne druge materije koje daju strani ukus. Izdašnost manja od 1:200 smatra se nedovoljnom.

12. Određivanje sadržaja benzaldehida

Za određivanje sadržaja benzaldehida koriste se sledeći aparati i pribor:

1) spektrofotometar - UV područje spektra;

2) kvarcne kivete prečnika 10 mm;

3) graduisane pipete od 1 ml i 5 ml;

4) normalni sudovi od 100 ml.

Reagensi

- benzaldehid p.a. (dvaput destilovan)

- apsolutni alkohol (etanol) i 10% vodeni rastvor etanola

Uzorak alkoholnog pića razblaži se destilovanom vodom na 10 vol% alkohola (ako je bezbojan i bez ekstraktivnih materija, može se razblažiti direktno, a ako je obojen i sa ekstraktivnim materijama, neophodna je njegova destilacija, s tim što se od 100 ml uzorka prihvata 100 ml odgovarajućeg destilata).

Razblaženi uzorak na 10 vol% alkohola podvrgava se čitanju na 249 nm.

Priprema dijagrama

Matični rastvor benzaldehida: izmeri se tačno 1 g benzaldehida i u normalnom sudu od 100 ml dopuni 10% vodenim rastvorom etanola do oznake (1 ml = 10 mg). Zatim se uzme 1 ml matičnog rastvora i 10% vodenim rastvorom etanola razblaži do 100 ml (1 ml = 0,1 mg, odnosno 100 mikrograma).

Radni standard rastvora benzaldehida

U šest normalnih sudova od po 100 ml otpipetira se 1, 2, 4, 6, 8 i 10 ml razblaženog matičnog rastvora (koncentracije 1 ml = 0,1 mg ili 100 mikrograma) i 10% vodenim rastvorom etanola dolije do 100 ml. Koncentracija benzaldehida u radnim standardima iznosi: 1, 2, 4, 6, 8 i 10 mikrograma/1 ml rastvora, što odgovara 1-10 mg/l 10% rastvora etanola.

Nakon očitavanja navedenih koncentracija u odnosu na čisti 10% vodeni rastvor etanola na talasnoj dužini 249 nm, nacrta se baždarni dijagram tako što se na apscisu nanesu koncentracije benzaldehida, a na ordinatu odgovarajuće apsorpcije (optičke gustine).

Obračun:

Sadržaj benzaldehida u mg/l a.a. = S · 10

gde je:

S = očitan sadržaj benzaldehida sa dijagrama

10 = preračunavanje na 100% etanol.

13. Određivanje ukupne cijanovodične kiseline (HCN)

Princip

Princip se zasniva na obrazovanju glutarnog aldehida uzajamnim delovanjem hlor-cijana i piridina, pri čemu se kondenzacija glutarnog aldehida vrši sa dimedonom. Molarni koeficijent gašenja svetla obrazovanog obojenog kompleksa iznosi 70 000.

Aparatura i pribor

Pored uobičajene laboratorijske opreme, koriste se i:

1) normalni sudovi od 50 ml i 100 ml;

2) graduisane mikropipete od 1 ml i 2 ml;

3) graduisane pipete od 5 ml i 10 ml;

4) spektrofotometar - vidljivo područje;

5) staklene kivete prečnika 10 mm.

Reagensi

- dimedon (5,5-dimetil 1,3-diketocikloheksan) 3% rastvor u 30% piridinu

- hloramin T - 1% vodeni rastvor

- fosfatni pufer pH-7,6: priprema se rastvaranjem u destilovanoj vodi 1,050 g Na2HPO4 · 2H2O i 0,1043 g KH2PO4 u normalnom sudu od 100 ml, promeša i koristi pri radu

- standardni rastvor cijanida - matični rastvor: odmeri se na analitičkoj vagi tačno 0,2503 g KCN i rastvori u 100 ml destilovane vode. Koncentracija ovog rastvora: 1 ml = 1 mg.

Od matičnog rastvora odmeri se pipetom (uz korišćenje propipete obavezno zbog vrlo jake toksičnosti KCN) 1 ml, ulije u normalni sud od 100 ml i dopuni destilovanom vodom. Koncentracija radnog standarda 1 ml = 10 mikrograma.

Postupak

Odmeri se pipetom ona zapremina bezbojne ili predestilovane rakije (prvenstveno rakije od koštičavog voća) koja sadrži od 1 do 20 mikrograma HCN, u balon od 50 ml doda se destilovana voda do 36 ml, a zatim redom sledeći reaktivi: 1 ml 1% rastvora hloramina T promeša i ostavi da reaguje jedan minut, zatim 10 ml fosfatnog pufera pH-7,6 i na kraju 3 ml reaktiva dimedon-piridin, promeša i ostavi da stoji najmanje 40 minuta. Očitavanje jarko ljubičaste boje vrši se između 40 i 55 minuta posle dodavanja reaktiva na talasnoj dužini 580 - 585 nm u staklenoj kiveti prečnika 10 mm. Sadržaj HCN obračunava se pomoću baždarnog dijagrama.

Priprema dijagrama

U pet normalnih sudova od po 50 ml dodaje se redom od radnog standarda: 0,1, 0,5, 1,0, 1,5 i 2,0 ml (što odgovara 1, 5, 10, 15 i 20 mikrograma HCN). Zatim se dodaje destilovana voda do 36 ml i reaktivi u istoj količini i istim redom kao kod uzorka rakije. Nakon 40 minuta očitaju se apsorpcije obojenih standardnih rastvora i nacrta dijagram, koji će se koristiti za obračunavanje ukupne HCN u uzorcima rakije i ostalih alkoholnih pića. Na apscisi se obeleže koncentracije HCN, u mikrogramima, a na ordinati odgovarajuće očitanje apsorpcije (optičke gustine obojenog rastvora).

Obračun

HCN u mg/l =  

S · 100

, odnosno  

S

  ako se uzme 10 ml uzorka alkoholnog pića.

1000

10

U retkim slučajevima kad rakija sadrži iznad 2 mg/l HCN, za analizu se uzima samo 1,0 ml ili još manje, što se pri obračunu uzima u obzir.

S = očitana vrednost HCN sa dijagrama, izražena u mikrogramima

1000 - preračunavanje na 1000 ml uzorka (kada se uzme 10 ml probe) deli se sa 1000 da bi se mikrogrami preveli u miligrame na litar uzorka.

Tabela 2

D’ 20°
    20°
relativna
gustina

Sadržaj alkohola

r 20°C
apsolutna
gustina
m/V

D’ 20°
    20°
relativna
gustina

Sadržaj alkohola

r 20°C
apsolutna
gustina
m/V

prema
Osbornu
% V/V

prema
Reichartu
% V/V

prema
Osbornu
m/m

prema
Osbornu
% V/V

prema
Reichartu
% V/V

prema
Osbornu
m/m

0.9999

0.07

0.07

0.05

0.99810

0.9949

3.50

3.52

2.78

0.99311

98

0.13

0.13

0.11

0.99800

48

3.57

3.59

2.84

0.99301

97

0.20

0.20

0.16

0.99790

47

3.64

3.66

2.90

0.99291

96

0.27

0.27

0.21

0.99780

46

3.71

3.73

2.95

0.99281

95

0.34

0.34

0.27

0.99770

45

3.79

3.81

3.01

0.99271

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

94

0.40

0.40

0.32

0.99760

44

3.86

3.88

3.07

0.99261

93

0.47

0.47

0.37

0.99750

43

3.93

3.95

3.12

0.99251

92

0.54

0.54

0.43

0.99740

42

4.00

4.02

3.18

0.99241

91

0.61

0.60

0.48

0.99730

41

4.07

4.09

3.24

0.99231

90

0.67

0.67

0.53

0.99720

40

4.15

4.16

3.30

0.99221

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

89

0.74

0.74

0.59

0.99710

39

4.22

4.24

3.36

0.99211

88

0.81

0.81

0.64

0.99700

38

4.29

4.31

3.41

0.99201

87

0.88

0.87

0.69

0.99690

37

4.36

4.39

3.47

0.99191

86

0.94

0.94

0.75

0.99680

36

4.44

4.46

3.53

0.99181

85

1.01

1.00

0.80

0.99670

35

4.51

4.54

3.59

0.99171

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

84

1.08

1.08

0.86

0.99660

34

4.58

4.61

3.65

0.99161

83

1.15

1.15

0.91

0.99650

33

4.66

4.69

3.71

0.99151

82

1.22

1.21

0.96

0.99640

32

4.73

4.76

3.76

0.99141

81

1.28

1.28

1.02

0.99630

31

4.80

4.84

3.82

0.99131

80

1.35

1.35

1.07

0.99620

30

4.87

4.91

3.88

0.99121

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

79

1.42

1.42

1.12

0.99610

29

4.95

4.99

3.94

0.99111

78

1.49

1.49

1.18

0.99600

28

5.02

5.06

4.00

0.99101

77

1.56

1.56

1.23

0.99590

27

5.10

5.14

4.06

0.99091

76

1.62

1.63

1.29

0.99580

26

5.17

5.21

4.12

0.99081

75

1.69

1.70

1.34

0.99570

25

5.25

5.29

4.18

0.99071

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

74

1.76

1.76

1.39

0.99560

24

5.32

5.36

4.24

0.99061

73

1.83

1.83

1.45

0.99550

23

5.40

5.44

4.30

0.99051

72

1.89

1.90

1.50

0.99541

22

5.47

5.51

4.36

0.99041

71

1.96

1.97

1.56

0.99531

21

5.55

5.59

4.42

0.99031

70

2.03

2.04

1.61

0.99521

20

5.62

5.66

4.48

0.99021

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

69

2.10

2.11

1.67

0.99511

19

5.70

5.74

4.54

0.99011

68

2.17

2.18

1.72

0.99501

18

5.77

5.81

4.60

0.99001

67

2.24

2.25

1.78

0.99491

17

5.85

5.89

4.66

0.98991

66

2.31

2.32

1.83

0.99481

16

5.92

5.96

4.72

0.98982

65

2.38

2.39

1.89

0.99471

15

6.00

6.04

4.78

0.98972

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

64

2.45

2.46

1.94

0.99461

14

6.07

6.12

4.84

0.98962

63

2.52

2.53

2.00

0.99451

13

6.15

6.19

4.91

0.98952

62

2.59

2.60

2.05

0.99441

12

6.23

6.27

4.97

0.98942

61

2.65

2.67

2.11

0.99431

11

6.31

6.34

5.03

0.98932

60

2.72

2.74

2.16

0.99421

10

6.38

6.42

5.09

0.98922

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

59

2.79

2.81

2.22

0.99411

09

6.46

6.50

5.16

0.98912

58

2.86

2.88

2.27

0.99401

08

6.54

6.58

5.22

0.98902

57

2.93

2.95

2.33

0.99391

07

6.61

6.65

5.28

0.98892

56

3.00

3.02

2.38

0.99381

06

6.69

6.73

5.34

0.98882

55

3.07

3.10

2.44

0.99371

05

6.77

6.81

5.40

0.98872

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

54

3.14

3.17

2.50

0.99361

04

6.85

6.89

5.47

0.98862

53

3.22

3.24

2.55

0.99351

03

6.92

6.97

5.53

0.98852

52

3.29

3.31

2.61

0.99341

02

7.00

7.04

5.59

0.98842

51

3.36

3.38

2.67

0.99331

01

7.08

7.12

5.66

0.98832

50

3.43

3.45

2.73

0.99321

00

7.16

7.20

5.72

0.98822

0.9899

7.24

7.28

5.78

0.98812

0.9849

11.34

11.39

9.11

0.98313

98

7.32

7.36

5.85

0.98802

48

11.43

11.47

9.17

0.98303

97

7.40

7.44

5.91

0.98792

47

11.51

11.56

9.24

0.98293

96

7.48

7.52

5.98

0.98782

46

11.60

11.64

9.31

0.98283

95

7.56

7.60

6.04

0.98772

45

11.68

11.73

9.38

0.98273

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

94

7.64

7.67

6.11

0.98762

44

11.76

11.82

9.45

0.98263

93

7.72

7.75

6.17

0.98752

43

11.85

11.90

9.52

0.98253

92

7.80

7.83

6.24

0.98742

42

11.93

11.99

9.59

0.98243

91

7.88

7.91

6.30

0.98732

41

12.02

12.07

9.66

0.98233

90

7.96

7.99

6.36

0.98722

40

12.10

12.16

9.73

0.98223

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

89

8.04

8.07

6.43

0.98712

39

12.19

12.25

9.80

0.98213

88

8.12

8.15

6.50

0.98702

38

12.28

12.34

9.87

0.98203

87

8.20

8.23

6.56

0.98692

37

12.36

12.43

9.94

0.98193

86

8.28

8.31

6.63

0.98682

36

12.45

12.52

10.01

0.98183

85

8.37

8.39

6.69

0.98672

35

12.53

12.61

10.08

0.98173

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

84

8.45

8.47

6.76

0.98662

34

12.62

12.69

10.15

0.98163

83

8.53

8.55

6.82

0.98652

33

12.71

12.78

10.22

0.98153

82

8.61

8.63

6.89

0.98642

32

12.79

12.87

10.29

0.98143

81

8.69

8.71

6.95

0.98632

31

12.88

12.96

10.36

0.98133

80

8.77

8.79

7.02

0.98622

30

12.96

13.05

10.43

0.98123

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

79

8.85

8.87

7.09

0.98612

29

13.05

13.14

10.50

0,98113

78

8.93

8.96

7.15

0.98602

28

13.14

13.22

10.57

0.98103

77

9.01

9.04

7.22

0.98592

27

13.23

13.31

10.64

0.98093

76

9.10

9.12

7.28

0.98582

26

13.32

13.40

10.72

0.98083

75

9.18

9.21

7.35

0.98572

25

13.41

13.49

10.79

0.98073

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

74

9.26

9.29

7.42

0.98562

24

13.49

13.57

10.86

0.98063

73

9.34

9.37

7.48

0.98552

23

13-.58

13.66

10.93

0.98053

72

9.43

9.45

7.55

0.98542

22

13.67

13.75

11.01

0.98043

71

9.51

9.54

7.62

0.98532

21

13.76

13.83

11.08

0.98033

70

9.59

9.62

7.68

0.98522

20

13.85

13.92

11.15

0.98023

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

69

9.67

9.70

7.75

0.98512

19

13.94

14.01

11.22

0.98013

68

9.76

9.78

7.82

0.98502

18

14.02

14.10

11.30

0.98003

67

9.84

9,87

7.89

0.98492

17

14.11

14.19

11.37

0.97993

66

9.92

9.95

7.95

0.98482

16

14.20

14.28

11.44

0.97983

65

10.00

10.03

8.02

0.98472

15

14.29

14.38

11.51

0.97973

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

64

10.09

10.11

8.09

0.98462

14

14.38

14.47

11.59

0.97963

63

10.17

10.19

8.15

0.98452

13

14.47

14.56

11.66

0.97953

62

10.25

10.28

8.22

0.98442

12

14.56

14.65

11.73

0.97943

61

10.34

10.36

8.29

0.98433

11

14.65

14.74

11.81

0.97933

60

10.42

10.44

8.36

0.98423

10

14.74

14.83

11.88

0.97923

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

59

10.50

10.53

8.42

0.98413

09

14.83

14.92

11.95

0.97913

58

10.59

10.61

8.49

0.98403

08

14.92

15.01

12.03

0.97903

57

10.67

10.70

8.56

0.98393

07

15.00

15.11

12.10

0.97893

56

10.75

10.78

8.63

0.98383

06

15.10

15.20

12.17

0.97883

55

10.84

10.87

8.70

0.98373

05

15.19

15.29

12.25

0.97874

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

54

10.92

10.96

8.76

0.98363

04

15.28

15.38

12.32

0.97864

53

11.00

11.04

8.83

0.98353

03

15.37

15.47

12.40

0.97854

52

11.09

11.13

8.90

0.98343

02

15.46

15.57

12.47

0.97844

51

11.17

11.21

8.97

0.98333

01

15.55

15.66

12.55

0.97834

50

11.26

11.30

9.04

0.98323

00

15.64

15.75

12.62

0.97824

0,9799

15.73

15.84

12.69

0,97814

0,9749

20.40

20.48

16.54

0,97315

98

15.82

15.93

12.77

0,97804

48

20.49

20.57

16.62

0,97305

97

15.91

16.03

12.84

0,97794

47

20.58

20.67

16.70

0.97295

96

16.00

16.12

12.92

0,97784

46

20.68

20.76

16.78

0,97285

95

16.09

16.21

12.99

0,97774

45

20.77

20.85

16.85

0,97275

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

94

16.19

16.30

13.07

0,97764

44

20.86

20.94

16.93

0,97265

93

16.28

16.39

13.14

0,97754

43

20.96

21.03

17.01

0,97255

92

16.37

16.49

13.22

0,97744

42

21.05

21.13

17.09

0,97245

91

16.46

16.58

13.29

0,97734

41

21.14

21.22

17.16

0,97235

90

16.55

16.67

13.37

0,97724

40

21.23

21.31

17.24

0,97225

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

89

16.64

16.76

13.44

0,97714

39

21.33

21.40

17.32

0,97215

88

16.74

16.86

13.52

0,97704

38

21.42

21.50

17.39

0,97205

87

16.83

16.95

13.60

0.97694

37

21.51

21.59

17.47

0.97195

86

16.92

17.04

13.67

0.97684

36

21.60

21.69

17.55

0.97185

85

17.01

17.14

13.75

0,97674

35

21.70

21.78

17.62

0.97175

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

84

17.10

17.23

13.82

0.97664

34

21.79

21.87

17.70

0.97165

83

17.20

17.32

13.90

0.97654

33

21.88

21.97

17.78

0.97155

82

17.29

17.41

13.97

0.97644

32

21.97

22.06

17.85

0.97145

81

17.38

17.51

14,05

0.97634

31

22.07

22.16

17.93

0.97135

80

17.47

17.60

14.13

0.97624

30

22.16

22.25

18.01

0.97125

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

79

17.57

17.69

14.20

0.97614

29

22.25

22.34

18.08

0.97115

78

17.66

17.79

14.28

0.97604

28

22.34

22.43

18.16

0.97105

77

17.75

17.88

14.36

0.97594

27

22.43

22.52

18.24

0.97095

76

17.84

17.98

14.43

0.97584

26

22.52

22.61

18.31

0.97085

75

17.93

18.07

14.51

0.97574

25

22.62

22.71

18.39

0.97075

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

74

18.03

18.16

14.58

0.97564

24

22.71

22.80

18.46

0.97065

73

18.12

18.26

14.66

0.97554

23

22.80

22.89

18.54

0.97055

72

18.22

18.35

14.74

0.97544

22

22.89

22.98

18.62

0.97045

71

18.31

18.45

14.82

0.97534

21

22.98

23.07

18.69

0.97035

70

18.40

18.54

14.90

0.97524

20

23.07

23.16

18.77

0.97025

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

69

18.50

18.63

14.97

0.97514

19

23.16

23.25

18.84

0.97015

68

18.59

18.73

15.05

0.97504

18

23.25

23.34

18.92

0.97005

67

18.69

18.82

15.13

0.97494

17

23.34

23.42

18.99

0.96995

66

18.78

18.91

15.21

0.97484

16

23.43

23.51

19.07

0.96985

65

18.88

19.01

15.28

0.97474

15

23.52

23.60

19.14

0.96975

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

64

18.97

19.10

15.36

0.97464

14

23.61

23.69

19.22

0.96965

63

19.06

19.19

15.44

0.97454

13

23.70

23.78

19.30

0.96955

62

19.16

19.28

15.52

0.97444

12

23.79

23:86

19.37

0.96945

61

19.26

19.38

15.60

0.97434

11

23.88

23.95

19.45

0.96935

60

19.35

19.47

15.68

0.97424

10

23.97

24.04

19.52

0.96925

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

59

19.45

19.56

15.76

0.97414

09

24.06

24.13

19.60

0.96915

58

19.54

19.65

15.84

0.97404

08

24.15

24.22

19.67

0.96905

57

19.64

19.75

15.92

0.97394

07

24.24

24.31

19.74

0.96895

56

19.74

19.84

16.00

0.97384

06

24.32

24.40

19.82

0.96885

55

19.83

19.93

16.08

0.97374

05

24.41

24.49

19.89

0.96875

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

54

19.93

20.02

16.16

0.97364

04

24.50

24.57

19.97

0.96865

53

20.02

20.11

16.23

0.97354

03

24.59

24.66

20.04

0.96855

52

20.12

20.21

16.31

0.97344

02

24.68

24.75

20.11

0.96845

51

20.21

20.30

16.39

0.97334

01

24.77

24.84

20.19

0.96835

50

20.30

20.39

16.47

0.97325

00

24.85

24.93

20.26

0.96825

0,9699

24.94

25.02

20.34

0.96815

0.9649

29.22

29.22

23.95

0.96316

98

25.03

25.10

20.41

0.96805

48

29.30

29.30

24.02

0.96306

97

25.12

25.19

20.48

0.96795

47

29.39

29.38

24.09

0.96296

96

25.21

25.28

20.56

0.96785

46

29.47

29.46

24.16

0.96286

95

25.30

25.37

20.63

0.96775

45

29.55

29.54

24.23

0.96276

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

94

25.38

25.45

20.71

0.96766

44

29.63

29.62

24.30

0.96266

93

25.47

25.54

20.78

0.96756

43

29.72

29.70

24.37

0.96256

92

25.56

25.63

20.85

0.96746

42

29.80

29.78

24.44

0.96246

91

25.65

25.71

20.93

0.96736

41

29.88

29.86

24.51

0.96236

90

25.74

25.80

21.00

0.96726

40

29.96

29.94

24.58

0.96226

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

89

25.83

25.89

21.08

0.96716

39

30.04

30.02

24.65

0.96216

88

25.91

25.97

21.15

0.96706

38

30.12

30.10

24.71

0.96207

87

26.00

26.06

21.23

0.96696

37

30.20

30.18

24.78

0.96197

86

26.09

26.14

21.30

0.96686

36

30.28

30.26

24.85

0.96187

85

26.18

26.23

21.37

0.96676

35

30.36

30.34

24,92

0.96177

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

84

26.26

26.31

21.44

0.96666

34

30.44

30.41

24.99

0.96167

83

26.35

26.40

21.52

0.96656

33

30.52

30.49

25.06

0.96157

82

26.43

26.48

21.59

0.96646

32

30.60

30.57

25.12

0.96147

81

26.52

26.57

21.66

0.96636

31

30.68

30.65

25.19

0.96137

80

26.61

26.65

21.73

0.96626

30

30.76

30.73

25.26

0.96127

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

79

26.69

26.73

21.81

0.96616

29

30.84

30.81

25.33

0,96117

78

26.78

26.82

24.88

0.96606

28

30.92

30.89

25.40

0.96107

77

26.86

26.90

21.95

0.96596

27

31.00

30.96

25.46

0.96097

76

26.95

26.99

22.02

0.96586

26

31.08

31.04

25.53

0.96087

75

27.04

27.07

22.10

0.96576

25

31.16

31.12

25.60

0.96077

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

74

27.12

27.15

22.17

0.96566

24

31.24

31.20

25.67

0.96067

73

27.20

27.24

22.24

0.96556

23

31.32

31.28

25.73

0.96057

72

27.29

27.32

22.31

0.96546

22

31.40

31.35

25.80

0.96047

71

27.37

27.41

22.38

0.96536

21

31.47

31.43

25.87

0.96037

70

27.46

27.49

22.45

0.96526

20

31.55

31.51

25.94

0.96027

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

69

27.54

27.57

22.52

0.96516

19

31.63

31.59

26.00

0.96017

68

27.63

27.66

22.60

0.96506

18

31.71

31.66

26.07

0.96007

67

27.71

27.74

22.67

0.96496

17

31.79

31,74

26.14

0.95997

66

27.80

27.82

22.74

0.96486

16

31.87

31.81

26.20

0.95987

65

27.88

27.91

22.81

0.96476

15

31.95

31.89

26.27

0.95977

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

64

27.97

27.99

22.88

0.96466

14

32.02

31.96

26.34

0.95967

63

28.05

28.07

22.95

0.96456

13

32.10

32.04

26.40

0.95957

62

28.13

28.15

23.02

0.96446

12

32.17

32.11

26.47

0.95947

61

28.22

28.24

23.10

0.96436

11

32.25

32.19

26.53

0.95937

60

28.30

28.32

23.17

0.96426

10

32.32

32.26

26.60

0.95927

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

59

28.39

28.40

23.24

0.96416

09

32.40

32.33

26.66

0.95917

58

28.47

28.48

23.31

0.96406

08

32.47

32.41

26.73

0.95907

57

28.55

28.57

23.38

0.96396

07

32.55

32.48

26.79

0.95897

56

28.64

28.65

23.45

0.96386

06

32.62

32.56

26.85

0.95887

55

28.72

28.73

23.52

0.96376

05

32.70

32.63

26.92

0.95877

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

54

28.80

28.81

23.59

0.96366

04

32.77

32.70

26.98

0.95867

53

28.89

28.89

23.66

0.96356

03

32.85

32.78

27.05

0,95857

52

28.97

28.98

23.74

0.96346

02

32.92

32.85

27.11

0.95847

51

29.06

29.06

23.81

0.96336

01

33.00

32.93

27.18

0.95837

50

29.14

29.14

23.88

0.96326

00

33.07

33.00

27.24

0.95827

0.9599

33.14

33.07

27.30

0.95817

0.9549

36.67

36.61

30.36

0.95318

98

33.22

33.15

27.37

0.95807

48

36.73

36.67

30.42

0.95308

97

33.29

33.22

27.43

0.95797

47

36.80

36.74

30.48

0.95298

96

33.36

33.29

27.49

0.95787

46

36.87

36.81

30.54

0.95288

95

53.44

33.37

27.56

0.95777

45

36.94

36.88

30.60

0.95278

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

94

33.51

33.44

27.62

0.95767

44

37.01

36.94

30.66

0.95268

93

33.58

33.51

27.68

0.95757

43

37.07

37.01

30.72

0.95258

92

33.65

33.58

27.74

0.95747

42

37.14

37.08

30.77

0.95248

91

33.73

33.66

27.81

0.95737

41

37.20

37.14

30.83

0.95238

90

33.80

33.73

27.87

0.95727

40

37.27

37.21

30.89

0.95228

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

89

33.87

33.80

27.93

0.95717

39

37.33

37.28

30.95

0.95218

88

33.95

33.87

28.00

0.95707

38

37.40

37.34

31.01

0.95208

87

34.02

33.95

28.06

0.95697

37

37.46

37.41

31.06

0.95198

86

34.09

34.02

28.12

0.95687

36

37.53

37.47

31.12

0.95188

85

34.16

34.09

28.18

0.95677

35

37.60

37.54

31.18

0.95178

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

84

34.23

34.16

28.25

0.95667

34

37.66

37.61

31.24

0.95168

83

34.31

34.23

28.31

0.95658

33

37.73

37.67

31.29

0.95158

82

34.38

34.31

28.37

0.95648

32

37.79

37.74

31.35

0.95148

81

34.45

34.38

28.43

0.95638

31

37.86

37.80

31.41

0.95138

80

34.52

34.45

28.49

0.95628

30

37.92

37.87

31.47

0.95128

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

79

34.59

34.52

28.56

0.95618

29

37.99

37.94

31.53

0.95118

78

34.66

34.59

28.62

0,95608

28

38.05

38.00

31.58

0,95108

77

34.74

34.66

28.68

0.95598

27

38.12

38.07

31.64

0.95099

76

34.81

34.73

28.74

0.95588

26

38.18

38.13

31.70

0.95089

75

34.88

34.81

28.81

0.95578

25

38.25

38.20

31.75

0.95079

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

74

34.95

34.88

28.87

0.95568

24

38.31

38.27

31.81

0.95069

73

35.02

34.95

28.93

0.95558

23

38.38

38.33

31.87

0.95059

72

35.09

35.02

28.99

0.95548

22

38.44

38.40

31.92

0.95049

71

35.16

35.09

29.05

0.95538

21

38.51

38.46

31.98

0.95039

70

35.23

35.16

29.11

0.95528

20

38.57

38.53

32.04

0.95029

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

69

35.30

35.23

29.17

0.95518

19

38.63

38.59

32.09

0.95019

68

35.37

35.30

29.23

0.95508

18

38.70

38.66

32.15

0.95009

67

35.44

35.37

29.29

0.95498

17

38.76

38.72

32.21

0.94999

66

35.50

35.44

29.35

0.95488

16

38.83

38.78

32.26

0.94989

65

35.57

35.51

29.41

0.95478

15

38.89

38.85

32.32

0.94979

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

64

35.64

35.57

29.47

0.95468

14

38.96

38.91

32.38

0.94969

63

35.71

35.64

29.53

0.95458

13

39.02

38.97

32.43

0.94959

62

35.78

35.71

29.59

0.95448

12

39.08

39.03

32.49

0.94949

61

35.85

35.78

29.65

0.95438

11

39.15

39.10

32.55

0.94939

60

35.92

35.85

29.71

0.95428

10

39.21

39.16

32.60

0.94929

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

59

35.99

35.92

29.77

0.95418

09

39.27

39.22

32.66

0.94919

58

36.05

35.99

29.83

0.95408

08

39.33

39.29

32.71

0,94909

57

36.12

36.06

29.89

0.95398

07

39.40

39.35

32.77

0.94899

56

36.19

36.13

29.95

0.95388

06

39.46

39.41

32.82

0.94889

55

36.26

36.20

30.01

0.95378

05

39.52

39.48

32.88

0.94879

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

54

36.33

36.26

30.07

0.95368

04

39.59

39.54

32.94

0.94869

53

36.39

36.33

30.13

0.95358

03

39.65

39.60

32.99

0.94859

52

36.46

36.40

30.18

0.95348

02

39.71

39.66

33.05

0.94849

51

36.53

36.47

30.24

0.95338

01

39.77

39.73

33.10

0.94839

50

36.60

36.54

30.30

0.95328

00

39.84

39.79

33.16

0.94829

0.9499

39.90

39.85

33.21

0.94819

0.9449

42.91

42.87

35.91

0.94320

98

39.96

39.92

33.27

0.94809

48

42.97

42.93

35.96

0.94310

97

40.02

39.98

33.33

0.94799

47

43.02

42.98

36.01

0.94300

96

40.09

40.04

33.38

0.94789

46

43.08

43.04

36.06

0.94290

95

40.15

40.11

33.43

0.94779

45

43.14

43.10

36.12

0.94280

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

94

40.21

40.17

33.49

0.94769

44

43.20

43.16

36.17

0.94270

93

40.27

40.23

33.54

0.94759

43

43.26

43.22

36.22

0.94260

92

40.33

40.29

33.60

0.94749

42

43.31

43.27

36.27

0.94250

91

40.39

40.36

33.65

0.94739

41

43.37

43.33

36.33

0.94240

90

40.46

40.42

33.71

0.94729

40

43.43

43.39

36.38

0.94230

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

89

40.52

40.48

33.76

0.94719

39

43.49

43.45

36.43

0.94220

88

40.58

40.54

33.82

0.94709

38

43.55

43.51

36.48

0.94210

87

40.64

40.60

33.87

0.94699

37

43.60

43.56

36.54

0.94200

86

40.70

40.66

33.93

0.94689

36

43.66

43.62

36.59

0.94190

85

40.76

40.73

33.98

0.94679

35

43.72

43.68

36.64

0.94180

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

84

40.83

40.79

34.04

0.94669

34

43.78

43.74

36.69

0.94170

83

40.89

40.85

34.09

0.94659

33

43.84

43.80

36.75

0.94160

82

40.95

40.91

34.15

0.94649

32

43.89

43.85

36.80

0.94150

81

41.01

40.97

34.20

0.94639

31

43.95

43.91

36.85

0.94140

80

41.07

41.03

34.26

0.94629

30

44.01

43.97

36.90

0.94130

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

79

41.13

41.09

34.31

0.94619

29

44.07

44.03

36.95

0.94120

78

41.19

41.15

34.36

0.94609

28

44.12

44.08

37.01

0.94110

77

41.25

41.21

34.42

0.94599

27

44.18

44.14

37.06

0.94100

76

41.31

41.27

34.47

0.94589

26

44.23

44.20

37.11

0.94090

75

41.37

41.33

34.52

0.94579

25

44.29

44.26

37.16

0.94080

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

74

41.43

41.39

34.58

0.94569

24

44.35

44.31

37.21

0.94070

73

41.49

41.45

34.63

0.94559

23

44.40

44.37

37.26

0.94060

72

41.55

41.51

34.69

0.94550

22

44.46

44.43

37.31

0.94050

71

41.61

41.57

34.74

0.94540

21

44.51

44.48

37.36

0.94040

70

41.67

41.63

34.79

0.94530

20

44.57

44.54

37.41

0.94030

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

69

41.73

41.69

34.85

0.94520

19

44.63

44.60

37.46

0.94020

68

41.79

41.75

34.90

0.94510

18

44.68

44.65

37.52

0.94010

67

41.85

41.81

34.95

0.94500

17

44.74

44.71

37.57

0.94000

66

41.91

41.87

35.01

0.94490

16

44.79

44.76

37.62

0.93991

65

41.97

41.93

35.06

0.94480

15

44.85

44.82

37.67

0.93981

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

64

42.03

41.98

35.11

0.94470

14

44.91

44.88

37.72

0.93971

63

42.08

42.04

35.17

0.94460

13

44.96

44.93

37.77

0.93961

62

42.14

42.10

35.22

0.94450

12

45.02

44.99

37.82

0.93951

61

42.20

42.16

35.27

0.94440

11

45.07

45.04

37.87

0.93941

60

42.26

42.22

35.32

0.94430

10

45.13

45.10

37.92

0.93931

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

59

42.32

42.28

35.38

0.94420

09

45.18

45.16

37.97

0.93921

58

42.38

42.34

35.43

0.94410

08

45.24

45.21

38.02

0.93911

57

42.44

42.40

35.48

0.94400

07

45.29

45.27

38.07

0.93901

56

42.50

42.46

35.54

0.94390

06

45.35

45.32

38.12

0.93891

55

42.55

42.52

35.59

0.94380

05

45.40

45.38

38.18

0.93881

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

54

42.61

42.57

35.64

0.94370

04

45.46

45.43

38.23

0.93871

53

42.67

42.63

35.69

0.94360

03

45.52

45.49

38.28

0.93861

52

42.73

42.69

35.75

0.94350

02

45.57

45.54

38.33

0.93851

51

42.79

42.75

35.80

0.94340

01

45.63

45.60

38.38

0.93841

50

42.85

42.81

35.85

0.94330

00

45.68

45.65

38.43

0.93831

0.9399

45.74

45.71

38.48

0.93821

0.9349

48.42

48.39

40.95

0.93322

98

45.79

45.76

38.53

0.93811

48

48.47

48.44

41.00

0.93312

97

45.85

45.82

38.58

0.93801

47

48.52

48.50

41.05

0.93302

96

45.90

45.87

38.63

0.93791

46

48.57

48.55

41.10

0.93292

95

45.96

45.93

38.68

0.93781

45

48.63

48.60

41.15

0.93282

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

94

46.01

45.99

38.73

0.93771

44

48.68

48.65

41.19

0.93272

93

46.07

46.04

38.78

0.93761

43

48.73

48.70

41.24

0.93262

92

46.12

46.10

38.83

0.93751

42

48.78

48.76

41.29

0.93252

91

46.17

46.15

38.88

0.93741

41

48.83

48.81

41.34

0.93242

90

46.23

46.21

38.93

0.93731

40

48.89

48.86

41.39

0.93232

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

89

46.28

46.26

38.98

0.93721

39

48.94

48.91

41.44

0.93222

88

46.34

46.32

39.03

0.93711

38

48.99

48.96

41.48

0.93212

87

46.39

46.37

39.08

0.93701

37

49.04

49.02

41.53

0.93202

86

46.45

46.43

39.13

0.93691

36

49.09

49.07

41.58

0.93192

85

46.50

46.48

39.18

0.93681

35

49.14

49.12

41.63

0.93182

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

84

46.55

46.53

39.23

0.93671

34

49.19

49.17

41.68

0.93172

83

46.61

46.59

39.28

0.93661

33

49.25

49.22

41.72

0.93162

82

46.66

46.64

39.33

0.93651

32

49.30

49.28

41.77

0.93152

81

46.72

46.70

39.38

0.93641

31

49.35

49.33

41.82

0.93142

80

46.77

46.75

39.43

0.93631

30

49.40

49.38

41.87

0.93132

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

79

46.83

46.80

39.48

0.93621

29

49.45

49.43

41.92

0.93122

78

46.88

46.86

39.53

0.93611

28

49.50

49.48

41.96

0.93112

77

46.93

46.91

39.58

0.93601

27

49.55

49.54

42.01

0.93102

76

46.99

46.97

39.63

0.93591

26

49.60

49.59

42.06

0.93092

75

47.04

47.02

39.68

0.93581

25

49.66

49.64

42.11

0.93082

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

74

47.09

47.07

39.73

0.93571

24

49.71

49.69

42.16

0.93072

73

47.15

47.13

39.78

0.93561

23

49.76

49.74

42.20

0.93062

72

47.20

47.18

39.83

0.93551

22

49.81

49.80

42.25

0:93052

71

47.25

47.24

39.87

0.93541

21

49.86

49.85

42.30

0.93042

70

47.31

47.29

39.92

0.93531

20

49.91

49.90

42.35

0.93032

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

69

47.36

47.34

39.97

0.93521

19

49.96

49.95

42.39

0.93022

68

47.42

47.40

40.02

0.93511

18

50.01

50.00

42.44

0.93012

67

47.47

47.45

40.07

0.93501

17

50.06

50.05

42.49

0.93002

66

47.52

47.50

40.12

0.93491

16

50.11

50.10

42.54

0.92992

65

47.58

47.56

40.17

0.93481

15

50.16

50.16

42.58

0.92982

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

64

47.63

47.61

40.22

0.93471

14

50.21

50.21

42.63

0.92972

63

47.68

47.66

40.27

0.93461

13

50.26

50.26

42.68

0.92962

62

47.74

47.71

40.32

0.93451

12

50.31

50.31

42.73

0.92952

61

47.79

47.77

40.37

0.93442

11

50.36

50.36

42.77

0.92942

60

47.84

47.82

40.42

0.93432

10

50.41

50.41

42.82

0.92932

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

59

47.90

47.87

40.47

0.93422

09

50.47

50.46

42.87

0.92922

58

47.95

47.92

40.52

0.93412

08

50.52

50.51

42.91

0.92912

57

48.00

47.98

40.57

0.93402

07

50.57

50.56

42.96

0.92902

56

48.05

48.03

40.61

0.93392

06

50.62

50.61

43.01

0.92892

55

48.11

48.08

40.66

0.93382

05

50.67

50.67

43.06

0.92883

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

54

48.16

48.13

40.71

0.93372

04

50.72

50.72

43.10

0.92873

53

48.21

48.18

40.76

0.93362

03

50.77

50.77

43.15

0.92863

52

48.26

48.24

40.81

0.93352

02

50.82

50.82

43.20

0.92853

51

48.31

48.29

40.86

0.93342

01

50.87

50.87

43.25

0.92843

50

48.37

48.34

40.90

0.93332

00

50.92

50.92

43.29

0.92833

Sledeći